Timothy Dalton a des origines anglaises par son père, et italiennes et irlandaises par sa mère, citoyenne américaine2. Il grandit à Manchester, dans le milieu du spectacle. Dalton découvre sa vocation dès l’âge de 16 ans en jouant une pièce de théâtre : Macbeth. Après avoir quitté ses études, il se joint au National Youth Theatre (théâtre national de la jeunesse), pendant trois étés, et étudie à l'Académie Royale d'Art dramatique pendant deux ans. Il fait ensuite partie de la troupe du théâtre de Birmingham en 1966, où il joue un grand nombre de premiers rôles. Son premier rôle au cinéma date de 1968, dans le film Le Lion en hiver (The Lion in Winter). Timothy Dalton y incarne le roi de France et partage l'affiche avec Peter O'Toole, Katharine Hepburn et Anthony Hopkins. Il est avant tout un grand acteur shakespearien, naviguant entre le théâtre, le cinéma et la télévision. Après quelques films au cinéma et à la télévision, Timothy Dalton obtient le rôle de James Bond, en août 1986, succédant à Roger Moore. Pierce Brosnan, tout d'abord pressenti pour incarner le personnage ne put interpréter le rôle, étant sous contrat avec la télévision pour la série Remington Steele. Timothy Dalton a donc interprété James Bond dans Tuer n'est pas jouer (The Living Daylights) en 1987, puis une deuxième fois en 1989 dans Permis de tuer (Licence to Kill). Sa composition permit de rendre Bond plus réaliste et beaucoup plus proche du héros de l'auteur Ian Fleming[réf. nécessaire]. En raison de litiges entre Eon et la MGM, la production du dix-septième film de la série James Bond (GoldenEye) fut repoussée de six ans. Pendant ce temps de nombreuses rumeurs ont circulé sur le remplacement de Timothy Dalton. En avril 1994, il refuse officiellement le rôle qui revient alors à Brosnan. Dalton a repris depuis sa carrière d'acteur au théâtre, bien qu'il continue d'apparaître au cinéma. En 2003, il tient de nouveau le rôle d'un agent secret dans Les Looney Tunes passent à l'action (Looney Tunes: Back in Action), puis en patron de supermarché dans la comédie noire Hot Fuzz en 2007. Il revient en 2009 dans l'épisode spécial de Noël de Doctor Who : La Prophétie de Noël (The End of Time) dans le rôle du Lord Président. En 2010, il interprète le rôle d'Alexei Volkoff dans la série américaine Chuck (saison 4).